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(五)佐剂制品()
为了增强疫苗制剂诱导家禽机体的免疫应答水平,以提高免疫效果,往往在疫苗的制备过程中加入适当的佐剂(也称免疫增强剂或免疫佐剂),制成的生物制剂即为佐剂制品。通常加入免疫佐剂的制品多数为灭活疫苗,加入佐剂后,会使灭活疫苗的免疫效果明显增强,延长灭活疫苗的免疫保护期。免疫佐剂的种类很多,较为常用的佐剂为氢氧化铝胶,制成的疫苗称为氢氧化铝胶疫苗,如鸡新城疫、产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗。其次为油佐剂,制成的疫苗称为油乳佐剂疫苗,如鸡新城疫油乳剂灭活疫苗。合格的油乳疫苗应为均匀的透明液体,如果疫苗出现了分层现象,则说明疫苗的品质有问题,或已经老化,这样的疫苗不能使用。除了氢氧化铝胶和油佐剂,还有很多化学物质以及生物学物质都可以作为佐剂使用。微生物用做佐剂的有结核杆菌、卡介苗、布鲁氏菌、短小棒状杆菌、百日咳杆菌、沙门氏菌、李氏杆菌、乳杆菌、双歧杆菌、链球菌等。微生物组分可以用作佐剂的有分枝杆菌细胞壁提取的胞壁酰二肽、乳酸菌及粪链球菌提取的细胞壁肽聚糖、革兰氏阴性菌提取的脂多糖、酵母菌提取的酵母多糖、香菇提取的香菇多糖和蜂胶等。
各种佐剂的作用机制不尽相同,但概括起来有如下几个方面:一是对抗原的作用,增加抗原分子的表面积,提高抗原物质的免疫原性,延长抗原在体内的存留时间,抗原与某些佐剂混合后形成凝胶状,延长抗原在体内的储存时间,增加抗原与机体免疫系统接触的广泛程度,从而明显提高抗原物质的免疫原性。二是对机体的作用,佐剂能引起细胞浸润,出现巨噬细胞、淋巴细胞及浆细胞聚集,促进这些细胞增殖发挥更大作用。一些佐剂的主要作用对象是T 细胞,通过T细胞的介导,增强各种免疫功能。某些佐剂可以直接作用于B细胞,但绝大多数佐剂物质所引起B细胞应答是在作用于巨噬细胞和T细胞之后。一些佐剂为碱性并含有较长的烃链,这些佐剂具有表面活性,作用于细胞膜,使细胞膜通透性增强,进而使溶酶体不稳定,从而释放出内含的水解酶类。细胞还释放出核酸和多核苷酸,这些物质均具有佐剂活性。
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一、疫苗选购的总体要求()
目前,市场上家禽用生物制品种类繁多,即使同一种类的疫苗生物制品也有多个厂家和品牌。养殖场(户)在有更多选择机会的同时,也增加了选择合适疫苗的难度。因此,为了确保选购到合适的疫苗,有效地预防和治疗家禽传染病,各饲养场应在有经验的兽医工作者的指导下选购,同时也要注意以下几个方面。
第一,要根据本地区或本场疫病的流行情况,拟定出所需疫苗的种类,如果购买疫苗,则应选择疫苗毒株血清型与本地区流行血清型一致,同时根据养禽场的规模*疫苗的数量。
第二,用于预防国家强制免疫的高致病性禽流感疫苗均由各地动物防疫站统一发售,因此一定要到指定的动物防疫站购买正规生物制品生产厂家的疫苗。进口疫苗都会有指定的代理商,应到正规的代售点购买。只有这样,才能保证买到货真价实的产品,而且在使用过程中一旦出现问题,也会有保障。
目前,我国明确规定,高致病性禽流感疫苗出厂时必须粘贴中国兽医药品监察所统一印制的专用防伪标签。广大用户在购买上述疫苗时一定要认准标志。中国兽药质量监督标志为直径13毫米或10毫米的圆形图案。标志圆环的上端为黑体中文“中国兽药质量监督”字样,下端为黑体英文“CHINA ANIMAL DRUGS QUALITY CONTROL”,中、英文之间由2颗五角星隔开,圆环内由盾牌、蛇杖、天平和中国地图组成(图3?1)。
图3?1 中国兽药质量监督标志
第三,购买疫苗时一定要注意检查疫苗的外包装,要选择包装规范、品名表示清晰、标签上有通俗易懂的完整说明,并配有使用说明书的产品。若为进口疫苗,则应配有中、英文两种说明书。兽医生物制品说明书必须注明一些信息,包括兽用标志、制品名称、主要成分及含量、性状、接种对象、用法与用量(冻干疫苗必须标明稀释方法)、注意事项(包括不良反应与急救措施)、有效期、规格、包装、贮藏方法、废弃包装处理措施、批准文号、企业信息等。
第四,检查所购疫苗有无兽药生产批准文号,正规产品在疫苗的包装上必须有农业部审批的兽药生产批准文号,其编制格式为兽药类别简称+年号+企业所在地省份(自治区、直辖市)序号+企业序号+兽药品种编号。如果为进口疫苗,应有农业部发给的进口生物制品的许可证证号。没有生产批准文号的产品一定不要购买。同时,一定要注意疫苗有效期的长短、是否已经过了有效期;包装瓶是否完整,若有裂纹、封口密闭不严、瓶内有异物、凝块、冻结或沉淀等情况时,一定不能购买;要严格按照疫苗要求的条件贮存和运输。
兽药生产批准文号是农业部根据兽药国家标准、兽药生产工艺和企业生产条件,经专家验收和评审合格发给生产企业的批准证明文件。
第五,首先选择GMP(良好的生产管理规范)厂家且有批准文号的疫苗,有批准文号的生物制品有严格的生产规范(规程)和质量控制标准。在使用“中试产品”时,首先要索取中试批号,并按规定申报,待批准后购入。同时,应谨慎注意生产厂家和中试文号,并与生产厂家签订责任事故赔偿协议。只有动物疫病非常严重时且又没有其他品种生物制品可以选择时才能使用,否则优先选用GMP厂家生产的有批准文号的生物制品。若选择的生物制品为进口产品时,则应具有进口生物制品的批准文号,销售部门应具有我国农业部颁发的《进口兽药登记许可证》,这样的产品都是通过了国家的质量检测,具有比较成熟的生产技术和工艺,质量比较稳定,免疫效果有保障,用户的经济利益能得到保证。
目前,中华人民共和国农业部下属的中国兽药信息网( ivdc。gov*)已经开通了“国家基础兽药数据库查询系统”,购买者可以登录查询系统,查询兽药生产企业的GMP 证书、兽药生产许可证、兽药产品批准文号等,还可查询进口生物制品信息,包括国内的合法代理机构、产品生产企业、产品名称、注册证号、批号、规格、注册证书失效日期、批签发等审批情况以及兽药监督抽检检验情况等。通过这些信息,为广大养殖场(户)选择优质疫苗提供了有用的*。
第六,不要购买假冒伪劣产品。目前,兽用疫苗市场比较混乱,由于生产疫苗利润较高,导致市场上出现了很多劣质产品,在购买疫苗时一定要注意辨别。现在一些大的生产厂家生产的疫苗都有防伪标志,购买时一定要按照厂家的防伪标志说明,认清防伪标志。
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(一)疫苗的性状()
疫苗一般有冻干粉和液体2种。冻干疫苗是经过低温冷冻真空干燥后制成的,可以长期保持生物学活性和抗原效价。弱毒疫苗均为冷冻真空干燥制品,其物理性状为疏松的海绵状物,呈白色或微黄色、微红色,易溶于水。
多数灭活疫苗为液体状态,如鸡新城疫灭活疫苗、鸡传染性法氏囊病灭活疫苗等,多数呈淡黄色、微红色或乳白色液体,半透明或不透明,有的分层,下部有沉淀。
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(二)疫苗的保存()
根据疫苗的不同特性,在保存方面需要特定的条件,要严格按照疫苗说明书上的规定要求保存。我国各生物制品厂生产的各类冻干疫苗,其用于保护有效免疫成分的保护剂或佐剂都不能在0℃以上时发挥有效作用,因此必须在低温条件下才能很好地保护冻干疫苗的免疫原性,故要求贮存和运输冻干疫苗的过程中,必须人为制造出一个适合或适应冻干疫苗自身条件的小环境,以确保疫苗的有效免疫原性,这一点是确保冻干疫苗在由生产厂家到用户手中的过程中,疫苗效果没有任何损失的首要条件。如果这一环节疫苗保存的必要条件未能满足,那么到消费者手中的疫苗免疫效果已经不是出厂时的判定指标,可能已经下降了许多。
疫苗厂应设置相应的冷库,防疫部门也应根据条件设置冷库、低温冷柜或冰箱、冷藏箱。冷冻真空干燥的疫苗,多数要求贮藏于…15℃以下,温度越低,保存的时间越长。如猪瘟兔化弱毒冻干疫苗,在…15℃条件下可保存1年以上,在0℃~8℃条件下只能保存6个月,若放在25℃条件下,最多10天即失去效力。大量生产实践证实,一些冻干苗在27℃条件下保存1周后有20%不合格,保存2周后有60%效力不合格。但也有特殊情况,如布鲁氏菌猪型2号苗要求在2℃~8℃保存。
疫苗使用单位必须设置必要的冷藏设备,疫苗运达后要认真核对和登记品名、批号、规格、数量、失效期等,并立即清点入库,按不同品种、批号分别贮放到规定的条件下保存。如果发现包装不合格、货单不符、批号不清以及质量异常等现象时,应及时与发货单位取得联系。保管疫苗要设专人,建立《禽用疫苗保管记录》,要经常检查冷藏设备的运转情况,以防冷藏设备不制冷时导致疫苗失效。使用单位还应注意疫苗的使用效果,如使用时发现问题,应保留样品,并尽快与相关疫苗厂家取得联系。
冻干疫苗应按说明书中的保存规定进行,一般需要低温保存(…15℃),在…15℃条件下保存时间不超过2年。需要说明的是,冻干苗的保存温度与冻干保护剂的性质有密切关系。一些国家生产的冻干苗可以在4℃~6℃条件下保存,因为使用了耐热保护剂。
未经真空冷冻干燥的活疫苗(也称湿苗)多数只能现制现用,在0℃~8℃条件下仅可短时期保存,严防冻结。活疫苗的保存切忌反复冻融,尤其是湿苗,每冻融1次效价就会损失50%左右。
灭活疫苗一般要求在2℃~8℃条件下保存,不能冻存。油乳剂灭活疫苗应保存在2℃~8℃的阴暗处,严防冻结,否则会出现破乳或出现凝集块,影响免疫效果。血清、诊断液等应保存在2℃~15℃条件下,不能过热,也不能低于0℃。
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(三)疫苗的运输()
由于疫苗对保存温度要求比较严格,因此运送兽用疫苗应采用最快的运输方法,尽量缩短运输时间。在运输过程中,不论使用何种运输工具运送疫苗都应注意防止高温、暴晒和冻融。运送时,疫苗要逐瓶包装,衬以厚纸或软草后装箱。弱毒疫苗要注意加冰低温运输,可先将疫苗装入盛有冰块的保温瓶或保温箱内运送,若长途运输则需使用冷藏车。
在夏季运输,要特别注意降温措施,防止温度过高而使疫苗失效。在冬季尤其是北方寒冷地区要避免液体疫苗冻结,尤其要避免由于温度高低不定引起的反复冻结和融化。切忌把疫苗放在衣袋内,以免由于体温较高而降低了疫苗的效价。大批量运输的疫苗应放在冷藏箱内,有冷藏车则最好用冷藏车运输,要以尽可能短的时间运送疫苗。
在实际工作中,疫苗的运输很难达到要求的温度,因此应尽量用最快的速度运达目的地,缩短运输时间,减少因运输原因造成疫苗效力降低。
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(一)疫苗的稀释方法()
疫苗稀释液的质量对疫苗免疫效果影响很大,不同的接种方法所用的稀释液不同。应根据疫苗生产单位推荐的方法选择稀释液。有的疫苗生产厂家提供稀释剂,部分疫苗的稀释剂还具有免疫增强剂的功能。用于注射的活疫苗,一般配备专用稀释液。若无专用稀释液,注射免疫时最好使用灭菌生理盐水稀释。用于饮水的疫苗的稀释剂可选用蒸馏水或去离子水,也可用洁净的深井水,但不能用自来水,因为自来水中的消毒剂会杀死疫苗中的细菌或病毒。用于气雾免疫的疫苗应选蒸馏水或去离子水作为稀释剂,如果稀释剂中含有盐,雾滴喷出后,由于水分蒸发,导致盐类浓度升高,会使疫苗失效,如马立克氏病疫苗等需用专门的稀释液。如果能在饮水免疫或气雾免疫的稀释剂中加入0。1%的脱脂奶粉,将会保护疫苗的活性。
在稀释疫苗时,因为冻干疫苗的瓶内是真空的,打开瓶塞时瓶内压力突然增大,可能会使部分病毒(或细菌)死亡,也会造成瓶内物质溅出,为避免这一现象发生,应用注射器吸入少量稀释液注入疫苗瓶中,充分振摇、溶解后,再加入其余稀释液,待瓶内疫苗溶解后再打开瓶塞。如果疫苗瓶太小,不能装入全部的稀释液,可把疫苗吸出放在另一个容器内,再用稀释液冲洗疫苗瓶几次,使全部疫苗所含病毒(或细菌)都被冲洗下来。吸取和稀释疫苗时,必须充分摇匀,被稀释后的液体应呈均匀一致的悬浮液。
稀释疫苗应指定专人负责,特别是注射多种疫苗时更要注意,以防搞错。稀释时要注意检查疫苗的质量,如发现包装瓶破损、失去真空或已干缩、变色等的疫苗应剔除并妥善处理。稀释时要防止污染,注意消毒。一定要现用现稀释,疫苗稀释后应掌握在1~2小时用完为宜。同时,稀释好的疫苗应放在阴凉处或置于保温箱中,避开日光和热源。
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(二)疫苗的使用剂量()
正确的免疫接种剂量是保证免疫效果的重要因素之一,疫苗的接种剂量应严格根据说明书的要求,确定相应的剂量。一般说明书的推荐剂量就足以产生较高的免疫力,不必擅自增加或减少接种剂量。
免疫接种疫苗剂量的大小对机体刺激的反应程度和对机体产生抗体水平有明显的影响。在一定范围内,随着接种剂量的增加,免疫反应性也提高。适当的剂量能刺激机体产生最大的抗体水平,次适当的剂量产生较低的抗体水平。若免疫的剂量过小,抗原量不足,则不能充分诱导机体免疫力的产生,不能有效地抑制病原体的繁殖,难以达到防疫的要求。
然而免疫剂量过大不仅会造成疫苗的浪费,有时还可能带来一些不良后果。剂量过大会造成变态反应和免疫麻痹,尤其是一些弱毒活疫苗,有的还存在一定的毒力。
另外,注射部位不当,也会导致免疫剂量不足。有的防疫人员在注射时,往往不对家禽进行保定,没有将疫苗注射到要求的部位,有的把本应该皮下注射的疫苗注射到肌肉中,或将应该肌内注射的注射到皮下或皮内,或将应该滴鼻、滴眼的疫苗通过饮水使用。在很大程度上影响了疫苗的接种剂量和接种部位的准确性,不能收到预期的免疫效果。
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四、疫苗的接种次数和间隔时间()
若同一禽群要用疫苗预防多种疾病,最好能使用多联疫苗,如果没有联合疫苗可供选择,则只能用一种疫苗预防一种疾病,此时一定要注意不同种疫苗不能同时注射同一家禽群,要有一定的间隔时间,两次接种的时间间隔多久合适,要具体视疫苗的种类、性质的不同,经过充分的实验来确定。
此外,某些种类的禽用疫苗1次预防接种不能达到预期的免疫效果,需要进行多次免疫接种。一般而言,灭活疫苗的多次接种的间隔时间为2~3周为宜,而活疫苗在规定的免疫持续期内,不必进行2次及2次以上的免疫接�